АСТ/АСАТ/АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗА. Кинетический УФ метод
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения аспартатамино-трансферазы в сыворотке, свободной от гемолиза.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Аспартатаминотрансфераза (АST или GOT) катализирует перенос аминогрупп от аспартата к 2-оксоглутарату посредством реакций, описанных ниже.
Уменьшение интенсивности окраски NADH, измеренной при длине волны 340 (334-365) nm, пропорционально активности АSТ.
Аспартат+2-Оксоглутарат ——AST——> Оксалацетат+Глутамат
Оксалацетат +NADH+H+Малат+ ——MDH——> NAD+
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Аминотрансферазы катализируют образование глютаминовой кислоты из 2-оксиглютарата путем переноса аминогрупп. Наибольшие концентрации AST определяются в печени, сердечных мышцах, а также в почках и поджелудочной железе. Сывороточная концентрация AST повышается при гепатите и заболеваниях печени, сопровождающихся некрозом гепатоцитов: инфекционном мононуклеозе, холестазе, циррозе, карциноме печени, белой горячке и при назначении различных лекарственных средств, таких как опиаты, салицилаты или ампицилин. Концентрация AST в сыворотке повышается после инфаркта миокарда, при заболеваниях скелетных мускулов, при остром панкреатите и других заболеваниях.
Клинический диагноз должен устанавливаться на основе интеграции клинических и лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Reagent А |
рН 7,8 |
|
Трис
L-аспартат
Лактат дегидрогеназа
Малат дегидрогеназа
Азид натрия |
88 mmol/l
260 mmol/l
> 1500 U/l
> 900 U/l
1 g/l |
|
Reagent В |
NADH
2-оксоглутарат
азид натрия |
0,24 mmol/l
12 mmol/l
1 g/l |
|
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Реагенты стабильны при 2-8ºС до срока, указанного на этикетке.
Признаки непригодности реагентов: абсорбция Рабочего реагента ниже 1,200 при 334 nm (кюветы на 1 cm).
ОБРАЗЦЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Сыворотка, свободная от гемолиза.
Стабильность AST в сыворотке при 2- 8ºС 7 дней.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
АST/GOT < 37 U/l4. Данные величины ориентировочны, рекомендуется определение собственных референтных значений в каждой лаборатории.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля хода реакции и процедуры измерения рекомендуется использовать нормальные и патологические контрольные сыворотки.
Каждая лаборатория должна установить собственную внутреннюю систему контроля качества.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Анализатор, спектрофотометр или термостатирующий фотометр на 37ºС с фильтром 340 (334-365) nm. Дозатор от 100 µl до 1,0 ml. Кюветы 1,0 cm.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Набор предназначен только для диагностики in vitro.
Образцы крови пациентов должны рассматриваться как потенциально опасные и обрабатываться как инфекционные.
При использовании набора следует соблюдать правила безопасности при работе с едкими и ядовитыми веществами.