Fructose Sp-DAC.Lq / Фруктоза в сперме фотометрический уф-метод
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения содержания фруктозы в сперме.
ПРИНЦИП МЕТОДА
D-фруктоза, в присутствии АТР, реагирует с гексокиназой (НК) с образова-нием фруктоза-6-фосфата. Фруктоза-6-фосфат реагирует с фосфо-глюко-изомеразой (PGI) с образованием глюкоза-6-фосфата, который, реагирует с глюкозо-6-фосфатдегидрогеназой (G6P-DH) с образованием NADPH.
Интенсивность образующейся окраски, измеренной при длине волны 340 (334-365) nm, пропорциональна концентрации фруктозы.
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Фруктоза - главный источник энергии для эякулированных сперматозоидов. Подвижность и жизнеспособность сперматозоидов зависят от скорости расщепления фруктозы – фруктолиз.
Обнаружение нормального уровня фруктозы подтверждает наличие семенных пузырьков и исключает врожденное отсутствие семявыносящих протоков или редко встречающуюся обструкцию эякуляторного протока.
Низкая концентрация фруктозы встречается у пациентов с низкой концентрацией андрогенов или указывает на врожденное отсутствие семявыносящего протока или семенных пузырьков, либо обструкцию эякуляторного протока в результате воспалительных заболеваний. Особенно важно это исследование при азооспермии, когда сочетание низкого уровня фруктозы, pH и ненормально высокого содержания лимонной кислоты указывают на врождѐнное отсутствие семенных пузырьков.
Клинический диагноз должен устанавливаться на основе интеграции клинических и лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Good Buffer: |
100 ml |
pH 7,5 |
Буферный раствор |
|
|
> 10 mmol/l |
NADP |
|
|
> 0,2 mmol/l |
Substrate: |
5 |
х 20 ml |
|
ATP |
|
|
> 2 mmol/l |
HK |
|
|
> 10 U/l |
Starter 1: |
1 |
х 2,5 ml |
|
G6P-DH |
|
|
> 5 U/l |
Starter 2: |
1 |
х 2,5 ml |
|
PGI |
|
|
> 50 U/l |
Diluent: |
2 |
х 65 ml |
|
Раствор для разведения образцов |
|
|
Standard: |
5 ml |
|
Фруктоза |
|
|
1 mg/ml |
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Реагенты при 2-8оС стабильны до срока, указанного на этикетке.
ОБРАЗЦЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Сперма. Используйте свежий образец.
Перед тестированием образец центрифугируйте при 3000 об/мин в течение 10 минут и разведите 10 µl образца в 600 µl раствора Diluent.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
Фруктоза 2 - 5 mg/ml.
Данные величины ориентировочны, рекомендуется в каждой лаборатории установить референтный интервал для своего населения.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Анализатор, спектрофотометр или термостатирующий при 37оС фотометр с фильтром 340 (334-365) nm. Дозаторы от 10 µl до 1000 µl.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля хода реакции и процедуры измерения рекомендуется использовать нормальные и патологические Контрольные сыворотки с известной концентрацией фруктозы.
Каждая лаборатория должна установить собственную внутреннюю систему контроля качества.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Набор предназначен только для диагностики in vitro.
Реагенты содержат нереактивные и консервирующие компоненты. Избегайте контакта с кожей и слизистыми.
Возможные остатки реагентов и образцы пациентов подлежат уничтожению в соответствии с утвержденными лабораторными правилами.