НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения аланинаминотрансферазы в сыворотке, свободной от гемолиза.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Аланинаминотрансфераза (АLT или GPT) катализирует перенос аминогрупп от аланина к 2-оксоглутарату посредством реакций, описанных ниже.
Уменьшение интенсивности окраски NADH, измеренной при длине волны 340 (334-365) nm, пропорционально активности АLТ.
Аланин+2-Оксоглутарат——ALP——>Пируват+Глутамат
Пируват +NADH+H
+——LDH——>Лактат+NAD
+
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Аминотрансферазы катализируют образование глютаминовой кислоты из 2-оксиглютарата путем переноса аминогрупп. В норме наибольшие концентрации ALT присутствует в печени и почках.
Сывороточная концентрация ALT повышается при гепатите и заболеваниях печени, сопровождающихся некрозом гепатоцитов: инфекционном мононуклеозе, холестазе, циррозе, карциноме печени, белой горячке и при назначении различных лекарственных средств, таких как опиаты, салицилаты или ампицилин.
Клинический диагноз должен устанавливаться на основе интеграции клинических и лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Reagent А |
рН 7,5 |
Трис
L-аланин
Лактат дегидрогеназа
Азид натрия |
110 mmol/l
600 mmol/l
> 1500 U/l
1,0 g/l |
Reagent В |
NADH
2-оксоглутарат
Азид натрия |
240 µmol/l
16 mmol/l
1,0 g/l |
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Реагенты стабильны при 2-8ºС до срока, указанного на этикетке.
Признаки непригодности реагентов: абсорбция
Рабочего реагента ниже 1,100 при 334 nm (кюветы на 1 cm).
ОБРАЗЦЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Сыворотка, свободная от гемолиза.
ALT в сыворотке при 2- 8ºС стабильна 7 дней.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
ALT/GPT < 40 U/l4.
Данные величины ориентировочны, рекомендуется определение собственных референтных значений в каждой лаборатории.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля хода реакции и процедуры измерения рекомендуется использовать нормальные и патологические контрольные сыворотки. Каждая лаборатория должна установить собственную внутреннюю систему контроля качества.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Анализатор, спектрофотометр или термостатирующий фотометр на 37ºС с фильтром 340 (334-365) nm. Дозатор от 100 µl до 1,0 ml. Кюветы 1,0 cm.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Набор предназначен только для диагностики
in vitro.
Образцы крови пациентов должны рассматриваться как потенциально опасные и обрабатываться как инфекционные.
При использовании набора следует соблюдать правила безопасности при работе с едкими и ядовитыми веществами.