Щелочная фосфатаза (ALP) в щелочной среде катализирует перенос фосфатной группы от 4-нитрофенилфосфата к диэтаноламину (DEA), с высвобождением 4-нитрофенола.
Интенсивность образующейся окраски, измеренной при длине волны 405 - 410 nm, пропорциональна активности ALP.
4-нитрофенил фосфат+DEA —— ALP——> DEA–фосфат + 4-нитрофенол
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Щелочная фосфатаза катализирует гидролиз моноэфиров органического фосфата в щелочной среде. Фермент присутствует практически во всех тканях организма, но особенно около и внутри клеточных мембран, а также в плаценте, эпителии кишечника, почечных канальцах, остеобластах и печени. Источником сывороточной щелочной фосфатазы являются печень и кости. Повышение содержания сывороточной ALP может быть вызвано следующими причинами: заболевания костной ткани, сопровождающиеся повышенной активностью остеобластов (болезнь Педжета, первичный и вторичный гиперпаратиреоидизм, опухоли кости, рахит, остеомаляция, переломы кости), различными заболеваниями печени: гепатит, обструктивная желтуха, токсические медикаментозные поражения печени, рак печени. Физиологические изменения, такие как рост кости или беременность, также могут вызвать повышение уровня ALP.
Клинический диагноз должен устанавливаться на основе интеграции клинических и лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Reagent А |
4x25 ml |
рН 10,2 |
Диэтаноламин
Магния хлорид |
1,25 mol/l
0,625 mmol/l |
Reagent В |
4x0,115 g |
При растворении: |
4-нитрофенилфосфат |
10 mmol/l |
Ядовит! Не допускать попадания на кожу и слизистые.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Реагенты стабильны при 2-8°С до срока, указанного на этикетке.
Признаки непригодности реагентов:
присутствие взвеси, мутность, абсорбция Рабочего реагента ≥ 1,30 при 405(±10) nm (кюветы на 1 cm).
ОБРАЗЦЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Сыворотка, свободная от гемолиза.
ALP в сыворотке при 2- 8°С стабильна 7 дней.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
Дети: 180 - 1200 U/l
Взрослые: 98 - 279 U/l
Данные величины ориентировочны, рекомендуется определение собственных референтных значений в каждой лаборатории.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля хода реакции и процедуры измерения рекомендуется использовать нормальные и патологические контрольные сыворотки.
Каждая лаборатория должна установить собственную внутреннюю систему контроля качества.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Анализатор, спектрофотометр или термостатирующий фотометр 37°С, с фильтром 405 - 410 nm.
Дозаторы на 20 µl и 1,0 ml.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Набор предназначен только для диагностики in vitro.
Образцы крови пациентов должны рассматриваться как потенциально опасные и обрабатываться как инфекционные.